mRNA體外轉錄合成

服務介紹  Service Introduction

        mRNA疫苗在COVID-19新型冠狀病毒傳染病的預防上起到巨大的作用而被業界所認可，mRNA therapeutics成為了一種擁有無限前景，可能顛覆現代醫學技術的基因治療平臺。與重組蛋白相比，mRNA生產通過體外轉錄合成，更加快速靈活，低成本。在過去的十幾年里，mRNA化學修飾和遞送系統的重大進展快速推動該項技術應用于臨床研究。mRNA 的應用前景非常廣闊。 除了能夠用于預防傳染性疾病，mRNA 疫苗也為治療 腫瘤、免疫疾病帶來了新的星火。

        艾基生物研發了可攜帶100~150bp的長鏈 polyA的載體且可以進行體外轉錄的質粒， 線性化的質粒用于T7體外轉錄方式制備mRNA，基因長度可以長達2kb~3kb。經過加帽和磁珠純化等一系列特定工藝流程，我們體外制備的mRNA分子可針對于不同的下游實驗進行定制以及優化，如細胞轉染、胚胎注射、生物藥和疫苗研制等。

服務優勢  Service Advantages

         A.   使用來源于噬菌體的T7 RNA聚合酶進行體外轉錄，可高效合成3 kb以上長度的mRNA分子

         B.   為mRNA分子添加5’ m7G帽子和3’100nt長度的 polyA尾巴，可以添加100個polyA以增強mRNA的穩定性和

               翻譯效率

         C．免費提供不同物種的密碼子優化，增強mRNA翻譯效率D． 轉錄產物經過DNase和磷酸酶處理，去除殘留DNA

               模板和mRNA 5’磷酸基團

載體圖譜

合成流程以及驗證

實驗驗證

        我們的體外轉錄mRNA經過專門優化，加強了穩定性并有助蛋白高效翻譯。下圖為使用我們設計的EGFP mRNA體外成功轉染HEK293T細胞以及純化后的mRNA電泳的案例：

293Ta-mRNA-0.5ug-轉染48h-100x-1

Cap 1帽子修飾的EGFP mRNA轉染HEK293T細胞-1

Cap 1帽子修飾的EGFP mRNA轉染HEK293T細胞-2

體外轉錄原理

左圖：反應時間與產量的關系         右圖：模板投入量與產量的關系

運輸/儲存 

        干冰運輸，收到樣本后-80℃保存。

注意事項

        1.艾基提供的mRNA保存于無酶水中并通過干冰形式運輸。

        2.接收到貨物后，請將mRNA放置于-80℃長期保存（可穩定保存至少6個月），或者放置于-20℃保存一周。

        3.mRNA的保質期為1年。請勿反復凍融mRNA，否則將導致其顯著降解。