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Protein purification service

    Protein purification is a process of separating a specific protein from a mixture of proteins. It is a critical step in many applications, including research, drug development, and diagnostics.

純化方法

原理

適用范圍

凝膠過濾層

根據分子間的大小或者形狀差異進行分離

根據生物活性物質與特異性配體間的特異性親和力來達到分離目的

離子交換層析

根據蛋白質分子表面靜電荷的差異進行分離

陽離子交換主要是改變pH,主要應用于等電點大于5的蛋白質;陰離子交換主要是改變鹽濃度,適用于大部分蛋白質,除雜能力較強,對熱源質、核酸、外毒素及電荷性有差別的蛋白效果顯著。

疏水層

根據蛋白質與疏水吸附劑之間的疏水作用差異進行分離

適用范圍廣,原則上可用于所有蛋白質的純化,適合于從大體積中提取低含量的目標蛋白,對DNA及小牛血清去除率較高

 

親和層析

根據生物活性物質與特異性配體間的特異性親和力來達到分離目的

適用于抗原抗體親和純化,以及一系列標簽純化

 

Common protein purification methods




        There are many different protein purification methods available. Some of the most common methods include:


        Size-exclusion chromatography (SEC): This method separates proteins based on their size.


        Ion-exchange chromatography (IEC): This method separates proteins based on their charge.


        Hydrophobic interaction chromatography (HIC): This method separates proteins based on their hydrophobicity.


        Affinity chromatography (AC): This method separates proteins based on their specific binding to a ligand.



比較項目

大小

純化原理

特點

HIS Tag

一般為6-8個組氨酸組合

組氨酸殘基上的咪唑基團可與層析介質中的金屬離子螯合,再通過提高緩沖液中咪唑濃度進行競爭性洗脫達到純化效果

標簽小,純化簡單;

能與其他標簽形成雙標簽;

能純化可溶性/包涵體蛋白

GST Tag

26KD

利用GST融合蛋白與固定的谷胱甘肽(GSH)通過硫鍵共價親和,通過GSH交換洗脫原理來進行純化

可溶性標簽,提高蛋白表達的可溶性;

不能應用于包涵體等需變形處理的純化

Flag Tag

8個氨基酸

DYKDDDDK

瓊脂糖上偶聯有flag抗體,可采用競爭性洗脫或酸性洗脫

在真核表達系統中表達效率更高;

可以純化有活性的融合蛋白,

 

MBP Tag

42.5 KD

 多糖樹脂吸附

 

可以減少目標蛋白的降解,增加蛋白的表達量和穩定性,提高表達產物的水溶性,但標簽較大,

對蛋白的結構和功能會有一定影響。

適用于包涵體的純化

Strep Tag

8個氨基酸

WSHPQFEK

生物素(biotin)和抗生物素蛋白鏈菌素(streptavidin)之間的結合反應。

純化流程溫和能保持目標蛋白活性;

能進行變性條件下的純化;

價格相對HIS Tag而言較高

 

 

Protein purification services



        Our protein purification services are designed to provide you with the highest quality purified proteins. We offer a variety of services to meet your specific needs, including:


        Recombinant protein purification


        Natural protein purification


        Labeled protein purification


        Unlabeled protein purification


        Insoluble protein purification



天然蛋白純化服務

 

項目名稱

純化方案                                

天然大分子蛋白分離純化

選用適當孔徑的分子篩分離純化,配合使用陰、陽離子吸附柱以及HLPC,鑒定并收取相應洗脫峰。

天然小分子蛋白分離純化

多層級分離過濾配合分子篩去除大分子雜質,結合使用大孔樹脂或反向樹脂純化小分子蛋白,經 HPLCMS鑒定純化。

混合未知蛋白樣品分離純化

由卡梅德生物制定相應方案進行分離純化,并經質譜鑒定、活性鑒定等多種方案確認分離產物。                       

 

重組蛋白純化服務


項目名稱

純化方案

重組蛋白脫標簽及分離純化

商品化親和純化樹脂,如Ni柱,GST-Beads等分離純化帶有6xHis、GST、SUMOMBP融合蛋白,獲得純度90%以上融合蛋白

不含標簽的重組蛋白純化

抗體親和純化;也可選擇類似于天然蛋白純化方式,依項目而定

包涵體變性與復性純化

根據蛋白質不同的性質,可以選擇尿素、鹽酸胍、去垢劑、極端pH等,以保證最大程度獲得單體狀態的變性蛋白


 

Service process



步驟

服務內容

周期

Step1:蛋白檢測前與預實驗

SDS-PAGE檢測蛋白情況;

小體積純化與檢測

1-2

 

Step2:蛋白純化與檢測

大量純化;

SDS-PAGE;

WB檢測(視項目而定);

濃度檢測

1-2

交付

純化報告,圖片數據;

成品蛋白

 

Service advantages



        Our protein purification services offer the following advantages:


        State-of-the-art equipment: We use the latest equipment to ensure the highest quality purified proteins.


        Expert technical support: Our expert technical team will work with you to develop the best purification strategy for your application.


        Comprehensive analysis: We provide comprehensive analysis of the purified protein to confirm its purity and quality.



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